Nouvelles

Jan 02, 2024

Anti

Rapports scientifiques volume 13,

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 8667 (2023) Citer cet article

448 accès

1 Altmétrique

Détails des métriques

L'infection à Toxoplasma gondii (T. gondii) continue d'augmenter dans le monde chez les humains et les animaux avec des défis socio-économiques et de santé publique élevés. Les médicaments actuellement utilisés contre l'infection à T. gondii sont limités en termes d'efficacité, de sécurité et d'accessibilité. Cette recherche a été menée pour évaluer l'effet supérieur de l'extrait de champignons sur la croissance des tachyzoïtes de T. gondii in vitro et éventuellement déchiffrer son mécanisme d'action. De plus, nous avons évalué l'effet de l'extrait sur la viabilité des fibroblastes du prépuce humain. Les extraits de méthanol de champignon de queue de dinde (TT) ont été testés contre la croissance des tachyzoïtes de T. gondii à l'aide d'une souche RH-RFP de type I qui exprime la protéine fluorescente rouge tout au long de la culture de manière dose-dépendante à l'aide d'un lecteur de plaques fluorescentes. De même, nous avons testé l'effet de l'extrait sur la viabilité des cellules hôtes. Nous avons observé que l'extrait de TT inhibait la croissance des tachyzoïtes avec une concentration minimale inhibitrice de 50 % (CI50), CI50 = 5,98 ± 1,22 µg/mL et une concentration cytotoxique de 50 % (CC50), CC50 ≥ 100 µg/mL. Il a été découvert que l'extrait de TT induisait une forte production de superoxyde mitochondrial et d'espèces réactives de l'oxygène et perturbait le potentiel membranaire des mitochondries dans les tachyzoïtes de T. gondii. De plus, la microscopie électronique à balayage a montré que l'extrait de TT et la pyriméthamine (PY) provoquaient une déformation morphologique des tachyzoïtes in vitro. En conclusion, l'extrait de méthanol TT composé de phytostérols, de sphingolipides bioactifs, de peptides, d'acides phénoliques et de lactones pourrait être une source prometteuse de nouveaux composés pour le développement futur de médicaments anti-Toxoplasma gondii. Les extraits étaient non cytotoxiques, même à des concentrations plus élevées.

La toxoplasmose est une maladie oculaire, congénitale et neuroparasitaire causée par un protozoaire unicellulaire, T. gondii. L'infection à T. gondii est répandue à l'échelle mondiale chez les humains et les animaux1,2,3. T. gondii est considéré comme un parasite négligé, cependant, son infection chez les humains et les animaux contribue aux problèmes de santé publique, vétérinaires et socio-économiques à l'échelle mondiale1,4. Selon le CDC, le parasite peut entraîner des complications menaçant la santé des femmes enceintes, de leurs fœtus et des personnes dont l'immunité est compromise4. Rien qu'aux États-Unis, on estime que plus de 40 millions de personnes pourraient avoir été infectées par ce parasite zoonotique efficace4.

Une étude récente a montré que les félins de la famille des félins ont un taux de séroprévalence allant de 35 à 75 % au niveau mondial5. Le problème le plus inquiétant associé à ce parasite est sa présence croissante dans la viande liée aux aliments et les produits d'animaux et d'oiseaux1. Les médicaments les plus recommandés pour le traitement de la forme à réplication rapide (tachyzoïtes) sont les antifolates (c'est-à-dire la pyriméthamine et la sulfadiazine)4,6,7. Cependant, cette combinaison et d'autres ont été signalées comme ayant plusieurs problèmes de toxicité, et l'échec du traitement au stade des tachyzoïtes n'élimine pas le stade à croissance lente (bradyzoïtes)6,7,8 et coûte cher aux communautés pauvres9. En raison de l'augmentation de ces nombreux défis et des taux de séroprévalence croissants chez les animaux domestiques et sauvages, les oiseaux, et l'émergence croissante de maladies qui pourraient affaiblir l'immunité chez l'homme, trouver de nouveaux nutraceutiques ou composés pour un développement ultérieur contre le co-parasite l'infection devient de plus en plus importante et nécessaire.

Il a été rapporté que les extraits à base de plantes, d'algues et de champignons et leurs métabolites ont des sources prometteuses de composés antiparasitaires qui pourraient être développés davantage en tant qu'agents antiparasitaires efficaces et sûrs10,11,12,13,14,15,16, 17.

Le champignon Trametes versicolor, classé comme polypore, a d'énormes usages médicinaux dans le monde18. Outre ses propriétés médicinales, il est riche en protéines essentielles, polysaccharides, stérols et leurs dérivés, sphingolipides bioactifs, triterpénoïdes et peptides, et possède des propriétés antioxydantes élevées15,16,19,20,21,22,23. Plus précisément, il a été rapporté que T. versicolor possède des propriétés antiparasitaires (par exemple contre Leishmania spp)15,16. D'autres ont également signalé ses vastes propriétés antitumorales24,25. Cependant, il n'existait aucune preuve de cet effet du champignon sur la croissance des tachyzoïtes de T. gondii in vitro et de son mécanisme d'action. La seule étude connue dans le domaine concernant les champignons (champignons) anti-T. gondii est l'étude utilisant le champignon Trichoderma stromaticum26. Dans cette étude, les chercheurs ont observé une diminution de la réplication de T. gondii in vitro et une amélioration de la toxoplasmose expérimentale in vivo26. Sur la base de nos études précédentes et d'autres sur les propriétés chimiques de ce champignon (TT), ses propriétés nutritionnelles et de santé et son activité anti-Leishmania spp11,15,23,27, il a suscité notre intérêt pour étudier son anti-T. gondii pour déchiffrer s'il pourrait être développé en un nutraceutique sûr et efficace pour les parasites zoonotiques, en particulier dans les pays en développement où les séroprévalences de ces parasites sont très élevées et où le champignon est abondant.

Dans cette étude, nous avons étudié l'effet de l'activité inhibitrice de l'extrait de champignon à queue de dinde sur les tachyzoïtes de T. gondii et évalué ses effets cytotoxiques. En outre, nous présentons un mécanisme d'action préliminaire possible de l'activité inhibitrice de l'extrait de champignon contre T. gondii in vitro.

Le spécimen de champignon [Trametes versicolor (queue de dinde)] utilisé dans cette étude a été collecté à Tuskegee en 2018/2019 et a été identifié par le Dr Frederick Lafayette, mycologue affilié à l'Université Tuskegee, Tuskegee, AL, USA. Le spécimen du champignon se trouve dans le laboratoire du Dr Daniel Abugri à l'Université d'État de l'Alabama, Montgomery, Alabama, États-Unis. Le champignon a été extrait avec du méthanol à 37 ° C pendant 3 jours et filtré à l'aide de papier filtre Whatman numéro 1. Les résidus ont été réextraits trois fois de plus avec 150 ml de méthanol. Tous les filtrats ont été rassemblés et séchés à l'aide d'un évaporateur d'azote/hotte de fumée, donnant environ 0,5 g d'extrait brut. L'extrait brut a été dissous dans du DMSO à raison de 2,54 mg/mL et stocké à - 20 °C jusqu'aux études antiparasitaires. Le pourcentage de DMSO dans chaque dilution d'extrait pour les essais biologiques était de 0,1 %.

La transcriptase inverse de la télomérase humaine (hTERT) a immortalisé des cellules de fibroblastes de prépuce humain (HFF) obtenues auprès du Dr Silva NJ. Moreno (Université de Géorgie, Athènes, Géorgie) a été maintenu en utilisant le milieu d'aigle modifié de Dulbecco (DMEM) sans rouge de phénol additionné de 5 % (v/v) de sérum bovin fœtal (FBS), 200 nM de L-glutamine et 1 % (v/ v) pénicilline-streptomycine obtenue auprès de (Life Technologies, USA) et incubée à 37 °C avec 5 % de CO2 et 95 % d'air atmosphérique. T. gondii (souche de type I, RH-RFP exprimant une protéine fluorescente rouge en culture ou RH-W, type sauvage gracieusement fourni par le Dr Silvia NJ Moreno, Université de Géorgie, Athènes, Géorgie) était le type de souche utilisé dans toutes les expériences. Les tachyzoïtes de T. gondii ont été récoltés en les faisant passer à travers une aiguille de calibre 27 suivi d'une filtration avec un filtre de 3 µm.

6 × 104 cellules hTERT/200 μL/puits ont été ensemencées dans les plaques 96 puits à fond plat noir et incubées à 37 °C avec 5 % de CO2 pendant 24 h28. Les cellules mortes ont été éliminées par lavage trois fois avec 1X Phosphate Buffered Saline (1XPBS). Les puits ont été remplis à nouveau avec 100 μL de milieu et 100 μL d'extrait TT préparés à des concentrations commençant à 0, 0,78, 1,53, 3,06, 6,125, 12,5, 25 et 50 μg/mL. PY (Santa Cruz Biotechnology Inc., Dallas, Texas, États-Unis) a été utilisé comme contrôle standard avec des plages de concentrations équivalentes testées en μg/mL. La plaque a été incubée à 37 °C avec 5 % de CO2 pendant 72 h. Ensuite, 10 μL de colorant Alamar Blue (Abcam, Waltham, MA, USA) ont été ajoutés dans les puits et la plaque a été enveloppée dans du papier d'aluminium et incubée dans des conditions de culture standard pendant une heure. Ensuite, les plaques ont été retirées de l'incubateur et les intensités de fluorescence de chaque puits ont été mesurées à une longueur d'onde d'excitation/émission de 485/535 nm, respectivement. Le pourcentage de viabilité des cellules hôtes a été calculé en comparant les intensités de fluorescence des cellules traitées avec le blanc (milieu avec des cellules sans médicament) et les valeurs CC50 déterminées à l'aide du logiciel graph Pad Prism. Les expériences ont été réalisées en quadruple (n = 4) avec trois puits indépendants chacun par expérience.

Pour tester les propriétés antiparasitaires de l'extrait de TT, nous avons ensemencé 6 × 104 cellules hTERT/200 μL/puits comme détaillé dans le test de cytotoxicité. Après 24 h d'adhérence et de confluence des cellules, les cellules mortes présentes ont été soigneusement éliminées en lavant trois fois avec du PBS 1X. 6 × 104 tachyzoïtes/100 μL de souche T. gondii RH-RFP Type I ont été ajoutés à chaque puits et incubés à 37 °C avec 5 % de CO2 pendant 3 h. Les parasites extracellulaires ont été éliminés par lavage avec du PBS 1X trois fois. Après le lavage, 100 μL d'extrait de TT ou de PY ont été ajoutés à des concentrations allant de 0 à 50 μg/mL pour l'extrait de TT, et 0 à 50 μM ont été utilisés pour le PY comme témoin standard. Seul le milieu a été utilisé comme témoin négatif. Les plaques ont été incubées à 37 °C avec 5 % de CO2 et lues à 48 h à l'aide d'un lecteur de microplaques à l'infini Tecan 200 F avec une excitation/émission réglée à 560 nm/635 nm28, respectivement. Le pourcentage de croissance du parasite a été calculé avec les formules : (fluorescence moyenne de la croissance parasitaire témoin-fluorescence de la croissance parasitaire traitée par le médicament/fluorescence moyenne de la croissance parasitaire témoin) × 100. Le pourcentage d'inhibition a été déterminé en utilisant la procédure rapportée par Huffman et al.28. Les expériences ont été réalisées en quadruple (n = 4) avec trois puits indépendants chacun par expérience.

1 × 105 tachyzoïtes (100 μL) de la souche T. gondii RH-Wild de type I ont été ajoutés à chaque plaque noire à 96 puits à fond plat. 1,56 et 50 μg/mL d'extrait TT, 500 μM de peroxyde d'hydrogène (H2O2) ont été utilisés comme contrôle positif et des milieux uniquement comme contrôle négatif ont été ajoutés dans chaque puits avec le même volume de 100 μL de milieu. La plaque a été incubée à 37°C avec 5% de CO2 pendant 30 min. 10 μL de 5 μM de réactif Cell ROX™ Purple (Invitrogen Catalogue # C10443) ont été ajoutés, la plaque a été enveloppée d'une feuille d'aluminium et incubée à 37 °C pendant 30 min. Les intensités de fluorescence ont été mesurées à l'aide d'un lecteur de microplaques à l'infini Tecan 200 F avec une excitation réglée à 560 nm et une émission à 635 nm. Les expériences ont été réalisées en triple (n = 3).

1 × 105 tachyzoïtes/100 μL de souche de type I de T. gondii RH-W (type sauvage) ont été ajoutés à chaque puits des plaques noires à 96 puits à fond plat pour évaluer la production de superoxyde mitochondrial par les parasites extracellulaires. Nous avons ensuite ajouté 1,56 et 50 μg/mL d'extrait de TT, 500 μM de H2O2 ont été utilisés comme contrôle positif et le milieu uniquement comme contrôle négatif dans les puits désignés. Les plaques ont été incubées à 37 °C avec 5 % de CO2 pendant 3 h. Après incubation, 50 μL de 5 μM de réactif MitoSOX ™ ont été ajoutés dans chaque puits, enveloppés d'une feuille d'aluminium et incubés à 37 ° C pendant 30 min selon le protocole de l'indicateur de superoxyde mitochondrial MitoSOX ™ Red (M36008) fourni par Invitrogen, États-Unis . Les intensités de fluorescence pour les puits expérimentaux ont été lues à l'aide d'un lecteur de microplaques à l'infini Tecan 200 F avec une excitation réglée à 485 nm et une émission à 535 nm. Les expériences ont été réalisées en triple (n = 3).

Pour déterminer si la production élevée de superoxyde présentée par l'extrait de TT avait un effet sur le potentiel de membrane mitochondriale de T. gondii, nous avons utilisé le test de sonde cationique JC-1 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, CA, USA). Ici, 1 × 105 tachyzoïtes fraîchement purifiés de la souche I de T. gondii RH de type sauvage / 50 μL de milieu ont été ensemencés dans une plaque à 96 puits à fond plat noir (Costar, Corning Inc., NY, USA). Ensuite, 50 μL de solution contenant 1,56 et 50 μg/mL de TT comme médicament expérimental, 50 μM de Carbonyl cyanure m-chlorophényl hydrazone (CCCP, d'Alfa Aesar, Haverhill, MA, USA) comme témoin positif et tampon de dosage (AB) comme contrôle négatif ont été ajoutés aux puits suivis d'une incubation de 8 h à 37 °C avec 5 % de CO228,29,30,31. 10 μL de JC-1 ont été ajoutés aux puits et les plaques de réaction ont été recouvertes d'une feuille d'aluminium et incubées pendant 45 min. Ensuite, suivi d'une centrifugation à 12 ° C pendant 2000 tr / min pendant 5 min, le surnageant a été retiré et 100 μL de tampon de dosage (Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) sans rouge de phénol) ont été ajoutés à chaque puits, suivis d'une centrifugation au même état et élimination du surnageant. Ensuite, 100 μL de tampon de dosage ont été ajoutés pour suspendre les parasites dans la solution. La fluorescence des parasites a été lue à 560/635 nm pour les agrégats J de JC-1 (590 nm) et à 485/535 nm pour les monomères J de JC-1 (529 nm) à l'aide d'un lecteur de microplaques à l'infini Tecan 200 F. Le rapport des valeurs de fluorescence des agrégats J aux valeurs de fluorescence des monomères a été calculé à l'aide des formules suivantes : Unités de fluorescence relative (RFU) des agrégats J (rouge)/RFU des monomères J (vert). Des images ont été prises pour chaque groupe de traitement à l'aide d'un microscope à fluorescence EVOS FL (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, USA). Les expériences ont été réalisées en triple (n = 3) et des graphiques ont été créés.

Une monocouche confluente de cellules Vero (1 × 105) par puits d'une plaque à 6 puits (avec lamelle sur les puits) a été préparée. Ensuite, 1 × 105 tachyzoïtes de souches de T. gondii RH-W, ainsi que 1,56 et 50 μg/mL de TT et 0,38 et 12,4 μg/mL de PY, ont été ajoutés dans chaque puits. La plaque a été incubée à 37°C avec 5% de CO2 pendant 48h. Les cellules ont ensuite été lavées avec du PBS 1X (3 fois) et traitées avec du glutaraldéhyde à 2,5 % et maintenues à 4 °C pendant la nuit. Ensuite, les cellules Vero contenant des tachyzoïtes ont été lavées avec du PBS 1X (3 fois), et du tétroxyde d'osmium à 1 % a été ajouté et maintenu dans l'obscurité pendant 1,5 h. Les cellules ont ensuite été lavées avec du PBS 1X (3 fois), déshydratées dans une série d'éthanol gradué (par exemple 50 %, 70 %, 90 %, 100 %), transférées dans de l'acétone à 100 %, puis séchées à l'air dans une hotte32. Après la déshydratation, les échantillons ont été recouverts d'or et imagés à l'aide d'un microscope électronique à balayage Zeiss EVO 50 (Carl Zeiss Microscopy, Thornwood, NY USA.

L'analyse a été réalisée sur un système UHPLC Vanquish (Thermo Fisher, USA) couplé à un spectromètre de masse orbitrap quadripolaire (Orbitrap Exploris 120, Thermo) avec ionisation par électrospray (H-ESI) en mode positif et négatif à l'aide du logiciel Xcalibur (V4.4.16.14 ). 10 μL de l'extrait TT (2,54 mg/mL) ont été injectés sur une colonne C18 (ACQUITY UPLC® BEH C18, 1,7 µm, 2,1 × 50 mm, Waters) avec un débit de 200 μL/min de phase mobile de la solution A ( 0,1 % d'acide formique dans 50 % d'eau et 50 % de méthanol) et la solution B (50 % d'acétonitrile et 50 % d'isopropanol avec 0,05 % d'acide formique) commençant à 30 % de B à 50 % de B en 1 min, suivi d'un gradient linéaire jusqu'à 100 % de B en 13 min, maintien 3 min, puis retour à 30%B et 3 min de rééquilibrage (durée totale de 21 min). La tension de pulvérisation a été fixée à 3,5 kV en mode positif et 3,0 kV en mode négatif. L'extrait méthanolique de TT a été injecté deux fois, un pour chaque mode. Le gaz de gaine a été réglé à 30, le gaz aux à 20 et le gaz de balayage à 0 (toutes des unités arbitraires) avec une température de vaporisateur et une température de tube de transfert d'ions de 300 et 350 °C, respectivement. La résolution orbitrap a été fixée à 120 000 pour MS et 15 000 pour DDA MS/MS avec 4 scans dépendants avec un seuil d'intensité de 20 000, une exclusion dynamique automatique et une liste de masse d'exclusion ciblée basée sur des injections à blanc. EASY-IC était activé pour le balayage MS avec une plage de 115 à 1000 Da. L'énergie de collision a été normalisée et échelonnée à 10, 40 et 100 avec le temps d'injection maximal réglé sur automatique. L'analyse phytochimique a été effectuée à l'installation de spectrométrie de masse de recherche de l'Université d'Auburn, à Auburn, en Alabama.

Les échantillons ont été traités avec Compound Discoverer 3.2 en utilisant les produits naturels et le flux de travail de métabolomique non ciblé avec la base de données sur les caroténoïdes, la base de données sur le métabolome humain et LipidMAPS.

Les IC50 et CC50 ont été obtenus à l'aide du logiciel Graph Pad Prism version 9.4.1. La comparaison des moyennes a été effectuée à l'aide du test de comparaison multiple de Tukey avec la valeur alpha fixée à 0,05.

Dans cette étude, nous rapportons pour la première fois les anti-T. gondii activité inhibitrice de l'extrait de champignon à queue de dinde (Trametes versicolor) in vitro. L'IC50 et la CC50 de l'extrait TT ont été calculées comme étant respectivement IC50 = 5,98 ± 1,22 µg/mL et CC50 ≥ 100 µg/mL. Pour contrôler la qualité de notre étude, nous avons utilisé la pyriméthamine (PY) comme contrôle standard qui a donné une IC50 = 4,98 ± 0,49 µM (1,22 ± 0,12 µg/mL) et CC50 ≥ 50 µM (12,44 µg/mL) (Tableau 1).

Les courbes d'inhibition de T. gondii pour les 48 h ont été présentées dans la Fig. 1 supplémentaire.

Pour confirmer que nos résultats d'inhibition efficaces des parasites obtenus étaient dus uniquement aux métabolites secondaires trouvés dans l'extrait de TT mais pas à la suite d'effets cytopathiques sur la croissance des tachyzoïtes, nous avons effectué un test de viabilité des cellules hôtes en utilisant les mêmes concentrations utilisées dans le test d'inhibition parasitaire. . Les résultats sont présentés dans le tableau 1. Fait intéressant, les concentrations d'extrait de TT et de PY testées n'étaient pas cytotoxiques pour les cellules hôtes aux concentrations de CI50 obtenues pour l'inhibition des tachyzoïtes de T. gondii à 48 h (tableau 1).

Les mitochondries sont des organites importants pour l'épanouissement énergétique de T. gondii. Dans cette étude, il a été constaté que l'extrait de TT induisait une diminution du potentiel de membrane mitochondriale (Fig. 1), ce qui implique que cela aurait pu affecter la survie et la réplication du parasite qui dépendent de l'énergie. Il y avait des différences statistiques entre le contrôle négatif (tampon de test uniquement) et l'extrait TT à 1,56 µg/mL (p < 0,0001), le tampon de test uniquement par rapport à l'extrait TT de 50 µg/mL (p = 0,0038) et le tampon de test uniquement par rapport au contrôle positif ( CCCP) (p < 0,0001). De plus, il y avait une différence statistique entre la perturbation potentielle de la membrane mitochondriale en utilisant le CCCP (contrôle positif) et les concentrations sélectionnées du TT testé avec p <0, 0001 (Fig. 1).

Rapport de la fluorescence de l'agrégat JC-1 (560/635 nm) à celle du monomère JC-1 (485/535 nm) à l'extrait TT, au tampon de dosage (contrôle négatif) et au cyanure de carbonyle m-chlorophényl hydrazone (CCCP) comme contrôle positif, **, **** indique des différences significatives entre les concentrations testées et les contrôles utilisés avec p < 0,01 et p < 0,0001, respectivement.

Il a été constaté que l'extrait de TT provoquait la production de superoxyde mitochondrial chez T. gondii in vitro (Fig. 2).

Effet de l'extrait de champignon à queue de dinde sur la production de superoxyde mitochondrial des tachyzoïtes de T. gondii. ** indiquent la signification avec p < 0,01. Le lecteur de plaque a utilisé le spectre d'excitation/émission de 485/535 nm. ns pas de différence significative.

De manière significative, l'extrait de champignon a provoqué la production de superoxyde de mitochondries tachyzoïtes avec une forte différence statistique entre le contrôle négatif (milieu uniquement) p < 0,01 et le contrôle positif (H2O2) p < 0,0001.

L'extrait méthanolique de 50 μg/mL de TT s'est avéré entraîner une production plus élevée d'espèces réactives de l'oxygène dans les tachyzoïtes par rapport aux milieux (témoin négatif) in vitro (Fig. 3) avec p < 0,0001. De même, la production de ROS de contrôle positif (500 μM de H2O2) était statistiquement différente par rapport à la génération de ROS de tachyzoïtes traités avec le milieu (témoin négatif) (p < 0,0001). Il y avait une différence significative entre le 1,56 μg/mL et le milieu (témoin négatif) avec p < 0,001. Au contraire, les ROS produites par les concentrations inférieures et supérieures de l'extrait de TT n'étaient pas dépendantes de la concentration.

Effet de l'extrait de champignon à queue de dinde sur la production d'espèces réactives de l'oxygène de T. gondii (stress oxydatif). *** et **** indiquent une signification avec p < 0,001 et p < 0,0001, respectivement. ns pas de différence significative.

La microscopie électronique à balayage (SEM) a été utilisée pour évaluer l'effet de TT et PY sur la morphologie externe des tachyzoïtes de T. gondii à l'intérieur des cellules Vero. Les tachyzoïtes traités étaient relativement gonflés avec des crochets (extensions). Le micropore (porte principale de l'endocytose normale), ainsi que sa forme en croissant, a été transformé en une forme inhabituellement effondrée, perforée et désintégrée caractérisée par davantage de trous, de boutons profonds et de rides (Fig. 4A – H). Ces effets étaient plus prononcés à des concentrations plus élevées de médicaments (50 μg/mL de TT et 12,44 μg/mL de PY) utilisées par rapport aux concentrations plus faibles des médicaments (1,56 μg/mL de TT et 0,38 μg/mL de PY) ( Fig. 4A–H). Les tachyzoïtes témoins (non traités) se sont avérés avoir une forme de croissant typique caractérisée par des surfaces externes lisses, régulières et complètes (Fig. 4I – J). Le modèle du résultat était cohérent avec le résultat précédent concernant l'effet du composé trouvé pour inhiber T. gondii32.

Microscopie électronique à balayage (MEB) photomicrographie de tachyzoïtes de T. gondii traités avec 1,56 μm (0,38 μg/mL) de PY (A, B), 50 μm (12,4 μg/mL) de PY (C, D), 1,56 μg/Ml de TT (E, F), 50 μg/Ml de TT (G, H) et du milieu comme contrôle négatif (I, J). crochet H, désintégration/effondrement cellulaire C, rupture/perforations de la membrane M ; et les longues flèches rouges indiquent les trous, la courte flèche blanche indique les rides et la courte flèche rouge indique les fossettes. Les flèches vertes indiquent la taille normale, lisse et régulière en forme de crête d'un tachyzoïte intracellulaire typique.

L'analyse par spectrométrie de masse a révélé que l'extrait de TT contenait des phytostérols, des ergostanes, du lanostane, des peptides, des acides gras, des triterpénoïdes, des acides phénoliques, des lipides (phospholipides et sphingolipides) et des vitamines (sup Tableau 1).

Traditionnellement, la toxoplasmose est traitée à l'aide d'inhibiteurs antifoliques (pyriméthamine et sulfadiazine)4,6,7. Cependant, ces médicaments et les médicaments de deuxième ligne utilisés pour le traitement ont de graves effets secondaires cliniques sur les patients et nécessitent des doses répétées pour l'élimination des parasites6,7,8. De plus, ces médicaments n'inhibent pas la forme de kyste tissulaire (bradyzoïte) de T. gondii6,7,8. Ces inconvénients actuels des médicaments ont nécessité la découverte de nouveaux composés qui pourraient traiter les infections parasitaires chez les humains et les animaux.

L'étude actuelle a montré que l'extrait de TT inhibait efficacement la croissance intracellulaire de T. gondii avec des effets cytotoxiques minimes (tableau 1). Notre valeur IC50 (5,98 µg/mL) était cohérente avec certains des travaux antérieurs rapportés sur la souche de type I de T. gondii (RH-YFP) utilisant des extraits naturels et des composés dérivés de Sorghum bicolor avec des IC50 allant de 0,36 à 20,38 µg/mL21, 22. Cependant, nos résultats différaient des expériences in vitro rapportées chez Leishmania spp15,16. Les raisons possibles du désaccord pourraient être en partie dues au solvant d'extraction, à la composition de l'extrait TT et au type de protozoaire testé.

La valeur IC50 typique pour PY contre la croissance des tachyzoïtes de T. gondii est comprise entre 0,0025 et 1,05 µg/mL28,33,34. Cependant, notre valeur pour PY était élevée. La valeur IC50 élevée rapportée pour la pyriméthamine pourrait avoir été attribuée à notre observation de la précipitation du médicament dans le milieu de culture et pourrait avoir causé moins d'absorption par les cellules tachyzoïtes et ainsi entravé sa puissance habituelle contre la croissance du parasite. Il convient de noter dans cette étude l'indice de sélectivité pour l'extrait de TT qui a été calculé comme étant > 17 et celui de PY comme > 10. Cela implique que l'extrait de TT aura un large spectre d'inhibition des tachyzoïtes de T. gondii in vitro plutôt que de provoquer un effet cytotoxique. effet comme on le voit dans le médicament primaire (PY) rapporté dans la littérature12.

Fait intéressant, plus de composés ont été trouvés dans ce travail actuel par rapport aux études précédentes utilisant le n-hexane Leliebre-Lara et al.15, Leliebre-Lara et al.16. Les différentes compositions de produits chimiques observées pourraient être attribuées à des paramètres saisonniers et géographiques23. De plus, dans des études antérieures de Leliebre-Lara et al.15,16, les extraits de n-hexane et d'éthanol ont été fractionnés, ce qui aurait pu supprimer certains de ces composants trouvés dans nos données de spectrométrie de masse à l'aide de l'extrait méthanolique. De plus, dans nos travaux précédents, nous avons découvert que le méthanol était le meilleur solvant pour extraire de grandes classes de métabolites secondaires dans les champignons27.

Nos données phytochimiques ont confirmé certaines des études précédentes sur la composition chimique de Trametes versicolor pour inclure l'ergostérol, le 5α, 8α-épidioxy-22E-ergosta-6, le 22-dien-3β-ol et l'acide trameténolique B dans les extraits TT obtenus à l'aide de n-Hexane15, 16.

De plus, il a été rapporté que ces composés ont des activités anti-Leishmania Leliebre-Lara et al.15, Leliebre-Lara et al.16. Par conséquent, les anti-T. gondii observées dans l'extrait de TT pourraient être attribuées à la présence de lipides bioactifs, d'acides gras, de peptides, d'acides organiques, de lactones, d'ergostérol, de 5α, 8α-épidioxy-22E-ergosta-6, 22-dien-3β-ol, d'acide traméténolique B et composés phénoliques11,14,15,16. Il a été constaté que les composés rapportés ici perturbent les membranes cellulaires, provoquent un arrêt de la croissance des cellules cancéreuses, provoquent une perturbation potentielle de la membrane mitochondriale et des productions de radicaux35,36.

Nos données sont étayées par des études antérieures utilisant des analogues de stérols synthétiques (22, 26-azo stérol et 24, 25-(R, S) épiminolanostérol) qui ont montré une inhibition efficace de la croissance des tachyzoïtes de T. gondii in vitro37,38. Ces stérols sont connus pour inhiber l'enzyme de biosynthèse des stérols 24(25)-stérol méthyltransférase (SMT) et ont été documentés pour avoir une forte activité inhibitrice contre plusieurs parasites protozoaires, y compris T. gondii, Trypanosoma cruzi, Leishmania spp37,38,39,40, 41 et Giardia lamblia42. Bien que T. gondii ne contienne pas la voie de biosynthèse des stérols43 que ces stérols ciblent dans d'autres protozoaires, il a été découvert qu'il provoque une distorsion des mitochondries, une perturbation de la membrane plasmique et éventuellement la mort des parasites38. La perturbation de la membrane mitochondriale observée par le test JC-1 dans ce travail actuel a soutenu le rapport précédent des chercheurs suivants37,38, sur la capacité des stérols à perturber les mitochondries des parasites conduisant à une phosphorylation oxydative inefficace et finalement à la mort des parasites. De manière significative, les données SEM ont montré que les traitements TT et PY présentaient des défauts morphologiques sur les tachyzoïtes intracellulaires. Plus précisément, on a observé que les tachyzoïtes avaient une taille gonflée avec des crochets (extensions). En outre, il a été observé que le micropore (porte principale de l'endocytose normale), ainsi que sa forme de croissant normale, présentaient une forme inhabituellement effondrée, perforée et désintégrée avec plus de trous, de boutons profonds et de rides (Fig. 4A – H). Ces altérations étaient plus prononcées à des concentrations plus élevées de médicaments (50 μg/mL de TT et 12,44 μg/mL de PY) par rapport aux concentrations plus faibles des médicaments (1,56 μg/mL de TT et 0,38 μg/mL de PY) utilisés (Fig. 4A–H). Cette observation était cohérente avec les découvertes précédentes concernant l'effet de certains types de composés trouvés pour inhiber la croissance de T. gondii32,37,38. Cette observation a confirmé que l'induction par l'extrait TT de productions élevées de ROS et de MitoSOX dans les tachyzoïtes entraînait une perturbation remarquable du potentiel membranaire mitochondrial (Figs. 1, 2, 3). De plus, ceux-ci peuvent avoir causé les déformations mitochondriales et les altérations structurelles trouvées dans les tachyzoïtes, qui doivent être confirmées par d'autres expériences.

D'autres études ont également montré que le peroxyde d'ergostérol (EP) qui a été identifié dans notre étude actuelle affecte la croissance d'Entamoeba histolytica44 ; activité anticancéreuse24, antitrypanosomienne17, anti-leishmania spp15,16 et propriétés antivirales45,46. Le mécanisme d'action antiviral EP (SRAS-COVID) serait associé à l'arrêt de la croissance cellulaire, provoquant un stress oxydatif, l'attachement, l'entrée et le blocage des stades précoce et intermédiaire post-entrée45,46. En outre, il a été rapporté que des composés tels que l'acide 3-bêta-hydroxylanosta-8, 24-dien-21-oïque [acide traméténolique (TAB)] inhibent la prolifération des cellules cancéreuses en inhibant l'activité H+/K+-ATPase47. Cela implique que TAB pourrait également avoir affecté l'activité H + / K + -ATPase de T. gondii et éventuellement la signalisation Ca2 + qui jouent un rôle crucial dans le fonctionnement du cycle lytique de T. gondii au niveau intracellulaire. Cette conjecture nécessite des études complémentaires. De plus, dans la littérature, il a été rapporté que l'acide ursolique inhibait les cellules MCF-7, provoquant l'apoptose des cellules conduisant à l'arrêt de G1 dans la mort des cellules cancéreuses48. Cette présence de composé dans l'extrait de TT pourrait également avoir contribué à l'arrêt de la prolifération parasitaire, aux ROS et à l'induction de MitoSOX entraînant la mort des tachyzoïtes.

Un autre composé qui a été découvert dans notre analyse d'empreintes digitales d'extrait de TT était l'enniatine B, qui a été documentée pour avoir une activité antibactérienne, antihelminthique, antifongique, herbicide et insecticide49. Ce mécanisme d'action composé se fait par l'induction d'une signalisation ROS élevée, de l'apoptose, de la fragmentation de l'ADN et de la modulation des canaux K+/Ca2+49.

Pris ensemble, tous les profils chimiques uniques de l'extrait de TT et les activités biologiques connues de certains de ces composés découverts, on pense que le TT a des composés puissants qui pourraient être explorés plus avant pour valider leur activité individuelle et combinée, en particulier dans les composés connus pour exercent des mécanismes d'action biologiques similaires.

En résumé, nos résultats sur l'activité inhibitrice de l'extrait de TT, ses effets moins cytotoxiques et le profil chimique ont montré qu'il existe des composés polaires qui pourraient être isolés pour un criblage ultérieur et une modification chimique pour des études in vivo. En outre, le ou les mécanismes d'action possibles de l'extrait de TT contre la mort de T. gondii étaient dus à une production élevée de ROS et de MitoSOX entraînant un stress parasitaire élevé, une dépolarisation de la membrane mitochondriale, des déformations morphologiques et éventuellement un effondrement des mitochondries.

Les données brutes utilisées pour les graphiques sont disponibles sur demande auprès de l'auteur correspondant. L'empreinte chimique de l'extrait de TT a été fournie dans le tableau supplémentaire 1.

Dubey, JP, Murata, FHA, Cerqueira-Cézar, CK, Kwok, OCH & Villena, I. Toxoplasmose congénitale chez l'homme : mise à jour du taux mondial d'infections congénitales. Parasitologie 148, 1716 (2021).

Article CAS PubMed Google Scholar

Pappas, G., Roussos, N. & Falagas, ME Instantanés de la toxoplasmose : état mondial de la séroprévalence de Toxoplasma gondii et implications pour la grossesse et la toxoplasmose congénitale. Int. J. Parasitol. 39, 1385–1394 (2009).

Article PubMed Google Scholar

Flegr, J., Prandota, J., Sovičková, M. & Israili, ZH Toxoplasmose – une menace mondiale. Corrélation de la toxoplasmose latente avec une charge de morbidité spécifique dans un ensemble de 88 pays. PLoS ONE 9, e90203 (2014).

Article ADS PubMed PubMed Central Google Scholar

CDC. Parasites-toxoplasmose (infection à toxoplasme) : épidémiologie et risque. Extrait du CDC : Centers for Disease Control Prevention : https://www.cdc.gov/parasites/toxoplasmosis/epi.html. Consulté le 1er mai 2023 (2023).

Montazeri, M. et al. La prévalence sérologique mondiale de Toxoplasma gondii chez les félidés au cours des cinq dernières décennies (1967-2017) : une revue systématique et une méta-analyse. Vecteurs parasites 13, 1–10 (2020).

Article CAS Google Scholar

Shammaa, AM, Powell, TG et Benmerzouga, I. Effets indésirables associés au traitement des infections à Toxoplasma. Sci. Rép. 11, 1–8 (2021).

Annonces d'article Google Scholar

Shiojiri, D., Kinai, E., Teruya, K., Kikuchi, Y. & Oka, S. Combinaison de clindamycine et d'azithromycine comme traitement alternatif de l'encéphalite à Toxoplasma gondii. Urgence Infecter. Dis. 25, 841 (2019).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Secrieru, A., Costa, IC, O'Neill, PM & Cristiano, ML Agents antipaludiques comme outils thérapeutiques contre la toxoplasmose - Un court pont entre deux maladies distantes. Molécules 25, 1574 (2020).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

La hausse de prix de 5 000 % de McCarthy, M. Drug met en lumière la flambée des prix des médicaments aux États-Unis. BMJ 351, h5114 (2015).

Article PubMed Google Scholar

Mkhize, SS, Machaba, KE, Simelane, MB & Pooe, OJ Produits dérivés de champignons comme thérapeutique antipaludique alternative : Une revue. Drug Dev Malaria Novel Approaches Prev Treat. 235–249 (2022).

Abugri, DA et al. Les champignons médicinaux comme nouvelles sources pour le développement de nouveaux médicaments antiparasitaires. Dans Medicinal Mushrooms 251–273 (Springer, Singapour, 2019a).

Abugri, DA, Witola, WH, Russell, AE & Troy, RM Activité in vitro de l'interaction entre la taxifoline (dihydroquercétine) et la pyriméthamine contre Toxoplasma gondii. Chem Biol Drug Des 91, 194–201 (2018).

Article CAS PubMed Google Scholar

Powers, JL, Zhang, X., Kim, CY, Abugri, DA & Witola, WH Activité des extraits d'algues vertes contre Toxoplasma gondii. Med Aromat Plants (Los Angels) 6, 2167–2412 (2017).

Google Scholar

Abugri, D., McElhenney, WH et Willian, KR Profilage des acides gras dans des champignons médicinaux comestibles et sauvages cultivés sélectionnés dans le sud des États-Unis. J. Exp. Chimie alimentaire. 2, 1–7 (2016).

Article Google Scholar

Leliebre-Lara, V., García, M., Nogueiras, C. & Monzote, L. Analyse qualitative d'un extrait éthanolique de Trametes versicolor et dépistage biologique contre Leishmania amazonensis. Emirates J. Food Agric. 592–595 (2015).

Leliebre-Lara, V. et al. Activité antileishmaniale in vitro des stérols de Trametes versicolor (Bres. Rivarden). Molécules 21, 1045 (2016).

Article PubMed PubMed Central Google Scholar

Ramos-Ligonio, A., Lopez-Monteon, A. & Wheats, Á. Activité trypanocide du peroxyde d'ergostérol de Pleurotus ostreatus. Phytother. Rés. 26, 938–943 (2012).

Article CAS PubMed Google Scholar

Jordan, KZ Composés biologiquement actifs des champignons Aphyllophorales (Polypore). J. Nat. Prod. 67, 300-310 (2004).

Article Google Scholar

Valisolalao, J., Luu, B. & Ourisson, G. Steroides cytotoxiques de polyporus versicolor. Tetrahedron 39, 2779–2785 (1983).

Article CAS Google Scholar

Habibi, E., Sadat-Ebrahimi, SE, Mousazadeh, SA et Amanzadeh, Y. Enquête mycochimique sur le champignon médicinal à queue de dinde Trametes versicolor (basidiomicètes supérieurs): une application potentielle de composés isolés dans des études pharmacologiques documentées. Int. J. Med. Champignons 17, 255–265 (2015).

Article PubMed Google Scholar

Abugri, DA, Jaynes, JM & Witola, WH Activité anti-toxoplasmique des fractions lipophiles dérivées du sorgho bicolore. BMC Rés. Notes 12, 1–7 (2019).

Article CAS Google Scholar

Abugri, DA, Witola, WH, Jaynes, JM & Toufic, N. Activité in vitro d'extraits de sorgho bicolore, 3-désoxyanthocyanidines, contre Toxoplasma gondii. Exp. Parasitol. 164, 12-19 (2016).

Article CAS PubMed Google Scholar

Abugri, DA, McElhenney, WH et Willian, KR Comparaison des méthodes de transestérification pour l'analyse des acides gras chez les champignons supérieurs : application aux champignons. Nourriture anale. Méthodes 5, 1159–1166 (2012).

Article Google Scholar

Tsukagoshi, S. et al. Christine (PSK). Traiter le cancer. Rév. 2, 131-155 (1984).

Article CAS Google Scholar

Yunoki, S., Tanaka, N., Hizuta, A. & Orita, K. Amélioration de la cytotoxicité antitumorale des lymphocytes hépatiques par administration orale de PSK. Int. J. Immunopharmacol. 16, 123-130 (1994).

Article CAS PubMed Google Scholar

Nascimento, LAC et al. L'extrait éthanolique du champignon Trichoderma stromaticum diminue la réplication de Toxoplasma gondii in vitro et améliore la toxoplasmose expérimentale in vivo. Courant. Rés. Microb. Sci. 3, 100173 (2022).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Abugri, DA & McElhenney, WH Extraction des composés phénoliques et flavonoïdes totaux à partir de champignons médicinaux sauvages et cultivés comestibles, tels qu'ils sont affectés par différents solvants. J. Nat. Prod. Ressource végétale. 3, 37–42 (2013).

CAS Google Scholar

Huffman, AM, Ayariga, JA, Napier, A., Robertson, BK et Abugri, DA Inhibition de la croissance de Toxoplasma gondii par la dihydroquinine et ses mécanismes d'action. Devant. Cellule. Infecter. Microbiol. 12, 852889 (2022).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhang, J., Si, H., Li, B., Zhou, X. & Zhang, J. Myrislignan présente des activités contre la souche Toxoplasma gondii RH en déclenchant un dysfonctionnement mitochondrial. Devant. Microbiol. 10, 2152 (2019).

Article PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhang, JL et al. Une nouvelle vie pour un vieux médicament. Effets in vitro et in vivo du médicament anthelminthique niclosamide contre la souche Toxoplasma gondii RH. Int. J. Parasitol. Médicaments Résistance aux médicaments. 9, 27–34 (2019).

Article CAS PubMed Google Scholar

Zhang, JL et al. Licarin-B présente une activité contre la souche Toxoplasma gondii RH en endommageant les mitochondries et en activant l'autophagie. Devant. Cellule. Dév. Biol. 9, 684393 (2021).

Article PubMed PubMed Central Google Scholar

Liu, Y. et al. Effets anti-Toxoplasma gondii d'un nouveau peptide d'araignée XYP1 in vitro et in vivo. Biomédecines 9, 934 (2021).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sanford, AG et al. Nouveaux chémotypes inhibiteurs de Toxoplasma gondii. Parasitol. Int. 67, 107–111 (2018).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Abugri, DA & Witola, WH Interaction de l'apigénine-7-O-glucoside avec la pyriméthamine contre la croissance de Toxoplasma gondii. J. Parasite. Dis. 44, 221-229 (2020).

Article PubMed Google Scholar

Bu, M. et al. Synthèse de conjugués de peroxyde d'ergostérol en tant que sondes ciblant les mitochondries pour une activité anticancéreuse améliorée. Molécules 24, 3307 (2019).

Article PubMed PubMed Central Google Scholar

Kobori, M., Yoshida, M., Ohnishi-Kameyama, M., Takei, T. et Shinmoto, H. 5α, 8α-épidioxy-22E-ergosta-6, 9 (11), 22-trien-3β-ol d'un champignon comestible supprime la croissance des cellules de la leucémie HL60 et de l'adénocarcinome du côlon HT29. Biol. Pharm. Taureau. 29, 755–759 (2006).

Article CAS PubMed Google Scholar

Martins-Duarte, É. S. et al. Évaluation de trois nouveaux azasterols contre Toxoplasma gondii. Vétérinaire. Parasitol. 177, 157–161 (2011).

Article CAS PubMed Google Scholar

Dantas-Leite, L., Urbina, JA, de Souza, W. & Vommaro, RC Activités sélectives anti-Toxoplasma gondii des azasterols. Int. J. Antimicrobe. Agents 23, 620–626 (2004).

Article CAS PubMed Google Scholar

Rodrigues, JC, Attias, M., Rodriguez, C., Urbina, JA & Souza, WD Altérations ultrastructurales et biochimiques induites par le 22, 26-azastérol, un inhibiteur de la Δ24 (25)-stérol méthyltransférase, sur les formes promastigotes et amastigotes de Leishmania amazonensis. Antimicrobien. Agents Chemother. 46, 487–499 (2002).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Magaraci, F. et al. Azastérols comme inhibiteurs de la stérol 24-méthyltransférase chez les espèces de Leishmania et Trypanosoma cruzi. J. Med. Chim. 46, 4714–4727 (2003).

Article CAS PubMed Google Scholar

Gros, L. et al. Evaluation des azasterols comme anti-parasitaires. J. Med. Chim. 49, 6094–6103 (2006).

Article CAS PubMed Google Scholar

Maia, C. et al. Les azastérols altèrent la prolifération de Giardia lamblia et provoquent l'enkystement. Biochimie. Biophys. Rés. Commun. 363, 310–316 (2007).

Article CAS PubMed Google Scholar

Coppens, I., Sinai, AP & Joiner, KA Toxoplasma gondii exploite l'endocytose médiée par les récepteurs des lipoprotéines de basse densité de l'hôte pour l'acquisition du cholestérol. J. Cell Biol. 149, 167-180 (2000).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Meza-Menchaca, T., Suárez-Medellín, J., Del Ángel-Piña, C. & Trigos, Á. L'effet amibicide du peroxyde d'ergostérol isolé de Pleurotus ostreatus. Phytother. Résolution 29, 1982-1986 (2015).

Article CAS PubMed Google Scholar

Duan, C., Liu, Y., Hao, Z. et Wang, J. Le peroxyde d'ergostérol supprime l'autophagie induite par le deltacoronavirus porcin (PDCoV) pour inhiber la réplication du virus via la voie de signalisation p38. Vétérinaire. Microbiol. 257, 109068 (2021).

Article CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Duan, C. et al. Les effets antiviraux du peroxyde d'ergostérol dans un modèle porcin d'infection par le deltacoronavirus porcin (PDCoV) impliquent la modulation de l'apoptose et de la jonction serrée dans l'intestin grêle. Vétérinaire. Rés. 52, 1–13 (2021).

Article Google Scholar

Zhang, Q. et al. Les activités inhibitrices H+/K+-ATPase de l'acide trameténolique B de Trametes lactinea (Berk) Pat, et ses effets sur les cellules cancéreuses gastriques. Fitoterapia 89, 210–217 (2013).

Article CAS PubMed Google Scholar

Martín-Cordero C, Reyes M, Ayuso MJ & Toro V. Triterpénoïdes cytotoxiques d'Erica andevalensis. Journal of Natural Research C. 56, 45–48 (2001).

Article Google Scholar

Prosperini, A. et al. Un examen de la mycotoxine enniatine B. Front. Santé publique 5, 304 (2017).

Article PubMed PubMed Central Google Scholar

Télécharger les références

Le projet a été financé par l'Alabama State University par l'intermédiaire du Département des sciences biologiques de la division du doctorat en microbiologie. programme. Nous sommes très reconnaissants au Dr Silvia NJ Moreno de l'Université de Géorgie, Athènes, Géorgie, et à son équipe pour avoir fourni le T. gondii et les lignées cellulaires hôtes pour l'étude. Nous sommes également reconnaissants au programme du Conseil STEM de l'Alabama pour avoir soutenu M. Jonathan Catrett dans son stage à l'ASU.

Ogechi Destiny Nwokeocha

Adresse actuelle : The School of Dentistry (SOD) Doctorate of Dentistry Program, Meharry Medical College, Nashville, TN, États-Unis

Ces auteurs ont contribué à parts égales : Homa Nath Sharma et Jonathan Catrett.

Département des sciences biologiques, Collège des sciences, de la technologie, de l'ingénierie et des mathématiques, Alabama State University, Montgomery, AL, 36104, États-Unis

Homa Nath Sharma, Audrey Napier, Boakai K. Robertson et Daniel A. Abugri

Doctorat en microbiologie Programme, Collège des sciences, de la technologie, de l'ingénierie et des mathématiques, Alabama State University, Montgomery, AL, 36104, États-Unis

Homa Nath Sharma, Audrey Napier, Boakai K. Robertson et Daniel A. Abugri

Laboratoire d'ethnomédecine, de parasitologie et de découverte de médicaments, Collège des sciences, de la technologie, de l'ingénierie et des mathématiques, Université d'État de l'Alabama, Montgomery, AL, 36104, États-Unis

Homa Nath Sharma et Daniel A. Abugri

Enterprise State Community College, Enterprise, AL, États-Unis

Jonathan Catret

Département de chimie, Collège des arts et des sciences, Université de Tuskegee, Tuskegee, AL, 36088, États-Unis

Ogechi Destiny Nwokeocha

Département de chimie et de biochimie, Collège des sciences et des mathématiques (COSAM), Université d'Auburn, Auburn, AL, 36849, États-Unis

Mélissa Boersma

Installation d'instrumentation de recherche de l'Université d'Auburn, Harrison College of Pharmacy, Université d'Auburn, Auburn, AL, 36849, États-Unis

Michael E. Miller

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

Vous pouvez également rechercher cet auteur dans PubMed Google Scholar

DAA a conçu l'idée d'étude; DAA et OD ont collecté le champignon et OD ont extrait les métabolites sous la supervision de DAAHNS, OD et CJ ont mené les expériences sous la supervision de DAAHNS, CJ et DAA traitent les données et ont construit les graphiques. MB et MEM ont réalisé la spectrométrie de masse et l'analyse par microscopie électronique, respectivement avec des contributions techniques à l'identification des composés et à l'identification des déformations des parasites. HNS a écrit le manuscrit initial; AN, BKR, MB et MEM ont fourni les ressources, apporté des contributions et contribué à la révision du manuscrit pour soumission. Tous les auteurs ont examiné le manuscrit final et l'ont approuvé pour soumission.

Correspondance à Daniel A. Abugri.

Les auteurs ne déclarent aucun intérêt concurrent.

Springer Nature reste neutre en ce qui concerne les revendications juridictionnelles dans les cartes publiées et les affiliations institutionnelles.

Libre accès Cet article est sous licence Creative Commons Attribution 4.0 International, qui permet l'utilisation, le partage, l'adaptation, la distribution et la reproduction sur n'importe quel support ou format, à condition que vous accordiez le crédit approprié à l'auteur ou aux auteurs originaux et à la source, fournir un lien vers la licence Creative Commons et indiquer si des modifications ont été apportées. Les images ou tout autre matériel de tiers dans cet article sont inclus dans la licence Creative Commons de l'article, sauf indication contraire dans une ligne de crédit au matériel. Si le matériel n'est pas inclus dans la licence Creative Commons de l'article et que votre utilisation prévue n'est pas autorisée par la réglementation légale ou dépasse l'utilisation autorisée, vous devrez obtenir l'autorisation directement du détenteur des droits d'auteur. Pour voir une copie de cette licence, visitez http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Réimpressions et autorisations

Sharma, HN, Catrett, J., Nwokeocha, OD et al. Activité anti-Toxoplasma gondii de l'extrait de champignon Trametes versicolor (queue de dinde). Sci Rep 13, 8667 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-35676-6

Télécharger la citation

Reçu : 02 février 2023

Accepté : 19 mai 2023

Publié: 29 mai 2023

DOI : https://doi.org/10.1038/s41598-023-35676-6

Toute personne avec qui vous partagez le lien suivant pourra lire ce contenu :

Désolé, aucun lien partageable n'est actuellement disponible pour cet article.

Fourni par l'initiative de partage de contenu Springer Nature SharedIt

En soumettant un commentaire, vous acceptez de respecter nos conditions d'utilisation et nos directives communautaires. Si vous trouvez quelque chose d'abusif ou qui ne respecte pas nos conditions ou directives, veuillez le signaler comme inapproprié.